(毕业论文 页数:38 字数:17618)中文摘要:目的：铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)为临床常见的条件致病菌，也是目前医院感染中最主要的病原菌之一。由铜绿假单胞菌引起的感染具有难治性、持续性、反复性等特点，其广泛分布于自然界，尤其是医院内环境中分布十分广泛。本研究监测医院内铜绿假单胞菌的医院感染分布及其对药物的敏感性，为制定有效的预防和治疗医院感染措施提供依据。
方法：对2004年6月-2007年6月×××中心医院住院各科室送检合格临床标本进行常规细菌分离培养与鉴定、进行药物敏感性测试，统计分析其院内感染的分布及耐药性。
结果：铜绿假单胞菌在送检标本中的检出率为5.29%（338株/6392株），338株铜绿假单胞菌中，痰液及咽试子共检出212株，构成比为62.72％，其次是伤口脓汁，共检出42株（12.43％），分泌液检出37株（10.95%），尿液检出19株（5.62％），血液检出14株（4.14％），胸腹水检出8株（2.37％）。铜绿假单胞菌在痰液标本中检出率最高，为9.75%，血液中检出率最低，仅为1.11%。主要分布在ICU病房，共检出171株，占总分离菌株的构成比为50.59%；其次是呼吸内科和骨科、烧伤科和脑外科，分别检出46株（13.61%）、38株（11.24%）、32株（9.47%）和24株（7.10%）。
16种抗菌药物中耐药率最高的是头孢西丁，高达94.7％，其次是复方新诺明、米诺环素和氯霉素，耐药率分别为90.2%、87.6和83.1%；敏感性最强的是亚胺培南，敏感率为80.8％，其次是头孢他啶、哌拉西林、阿米卡星、头孢吡肟和环丙沙星，敏感率为50.0%、43.5%、40.8%、40.8%和40.2%。
结论：铜绿假单胞菌在临床标本中以痰液和咽试子、伤口脓汁中检出最多，以呼吸道和伤口感染为主，与院内感染密切相关，且耐药性严重，表现为多重耐药。
关键词：铜绿假单胞菌；医院内感染；药敏分析


Abstract

Objective: Pseudomonas aeruginosa (agent) for common clinical conditions pathogens, and it is in the hospital infection one of the most important pathogens. Caused by Pseudomonas aeruginosa infection with refractory, persistent and repeated sexual characteristics, widely distributed in nature, especially in the hospital environment very wide distribution. The monitoring hospitals Pseudomonas aeruginosa infection in the hospital for drug distribution and the sensitivity for the development of effective prevention and treatment measures to provide the basis for hospital infection.
Methods: The June 2004 -2007, June Xiangfan City Center Hospital banning all sections of qualified clinical specimens conventional Isolation and identification of bacteria, drug sensitivity testing, statistical analysis and the distribution of nosocomial infection resistance.
Results: Pseudomonas aeruginosa in samples submitted in the detection rate of 5.29% (338 / 6392), 338 Pseudomonas aeruginosa, and pharyngeal examination of sputum were found 212, a ratio of 62.72%, followed by 4:1 wounds were found 42 (12. 43%), fluid detected 37 (10.95%), urine were 19 (5.62%), blood detected 14 (4.14%), pleural effusion or ascites were 8 (2.37%). Pseudomonas aeruginosa in sputum specimens in the highest detection rate, 9.75%, the lowest rate of detection in the blood, is only 1.11%. Mainly in the ICU ward, 171 were detected, of the total isolates the composition ratio of 50.59%; Followed by respiratory medicine and orthopedics, burn and brain surgery, respectively, were 46 (13.61%), 38 (11.24%), 32 strain (9.47%) and 24 (7.10%).
16 antimicrobial agents in the resistance rate is the highest and cefoxitin, up 94.7%, followed by the co-trimoxazole, minocycline and chloramphenicol-resistant rates were 90.2%, 83.1% and 87.6; Imipenem is the most sensitive, sensitive flu rate of 80.8%, followed by ceftazidime, piperacillin, cefepime, amikacin and ciprofloxacin, sensitivity was 50.0%, 43.5%, 40.8%, 40.8% and 40.2%.
Conclusion: Pseudomonas aeruginosa in clinical samples in a test of sputum and pharynx, wound up the detection of pathogens, respiratory tract and wound infections mainly with the closely related nosocomial infections, and serious resistance, performance of multiple drug resistance.
Key words: Pseudomonas aeruginos; hospital infection; antibiotics resistance.

目 录

一、中文摘要…………………………………………………………… （I）
二、 英文摘要…………………………………………………………… （III）
三、引 言…………………………………………………………… （1）
四、正 文
实验材料…………………………………………………………… （3）
实验方法…………………………………………………………… （7）
实验结果……………………………………………………………（10）
讨 论 ………………………………………………………… （15）
结 论 ………………………………………………………… （17）
参考文献………………………………………………………… （18）
五、综 述
正 文 ………………………………………………………… （22）
参考文献 ………………………………………………………… （27）
六、后 记……………………………………………………………（31）

引 言
铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)，又称绿脓杆菌，是假单胞菌属的代表菌种，在自然界分布广泛，在水、空气、正常人体的皮肤、呼吸道、肠道及医疗器械上等都有本菌存在。铜绿假单胞菌是一种条件致病菌，常引起ICU、血液及神经内科等重症病房患者感染，并可经血液传播，导致菌血症及败血症，烧伤后感染铜绿假单胞菌可造成死亡，易发生在免疫力受损的患者身上，尤其在气管插管、气管切开和使用机械通气的病人，是医院感染的主要病原菌之一。
医院感染是一个全球性问题，全球平均感染率为8.7％。在我国，据全国医院感染监控网中心对全国126所医院的监测[1]，1998～1999年，医院感染率为3.92％，而到了2001年，这些医院的人次感染率和例次感染率分别为5.22％和5.58％，发病科室由高到低依次为内科、外科、儿科、妇科、产科和五官科，发生的部位排在前五位的依次为呼吸道、泌尿道、手术部位、胃肠道和皮肤软组织；《2003年我国医院感染监测网报告》显示，2003年上半年监测住院患者454511人，医院感染率为9.1%；目前我国每年大约有5000万住院病人,其中约有500万患者出现医院感染, 我国每年发生医院内感染的人数占住院总人数的9.7%左右，每年造成的额外的医疗消费约100亿人民币[2-7]。严重的医院感染往往使病人所患的疾病不能达到预期的疗效，甚至产生难以治疗的后遗症或死亡，由此产生的健康和经济损失颇为惊人。近年来，该菌在医院感染中的检出率不断提高。
铜绿假单胞菌是医院感染的常见菌,其发生率和耐药性也是最高的。近年来随着β一内酰胺类抗生素、免疫抑制剂、抗肿瘤化疗药物的广泛应用，该菌引起的耐药性越来越严重[8]。特别是随着第三代头孢菌素的普及,耐三代头孢的菌株不断增加。随着亚胺培南的使用,耐药菌株也在上涨,且耐药性问题严重。其耐药性发展之快，与广泛用药、不合理用药密切相关[1]、[9]，抗菌药物不合理使用，会引起诸如抗菌药物相关性腹泻、真菌二重感染、耐药菌株（如MRSA、ESBL阳性菌株）感染等医院感染，使医院感染率升高，因此合理使用抗菌药物在医院感染管理工作中意义重大。铜绿假单胞菌具有多重耐药性，能天然抵抗多种抗生素，且易在抗生素治疗过程中发展为耐药，有报道铜绿假单胞菌多重耐药菌株占临床耐药菌株的4%～26.3%[10-14]。
铜绿假单胞菌耐药机制主要有多种: β-内酰胺酶的产生；细菌外膜通透性降低；菌体蛋白结构和功能的变化；外膜上存在着特异的药物主动外排系统；氨基糖甙类钝化酶的产生；靶位改变；细菌生物被膜形成等[15]。其中产生β一内酰胺酶是铜绿假单胞菌对β一内酰胺类抗生素耐药的主要原因，随着新的β一内酰胺类抗生素应用于临床，细菌也产生了多种β一内酰胺酶，如超广谱β一内酰胺酶(ESBLs)、质粒介导的AmpC酶、碳青霉烯酶等[16-18]。
由于铜绿假单胞菌能通过不同的机制产生对抗菌药物的耐药，导致临床治疗的失败。因此对其在院内感染分布及药敏情况进行分析非常必要。本研究对×××中心医院2004年6月-2007年6月临床送检标本中检验科分离出的338珠铜绿假单胞菌进行回顾性分析，对铜绿假单胞菌院内感染分布情况及药敏结果以及耐药性动态变化进行探讨，力求对铜绿假单胞菌在院内感染的预防和治疗方面提供有益的参考性意见。

材 料
1. 标本来源
1.1 所有临床标本均来自2004年6月-2007年6月×××中心医院住院部各科室送检的痰液及咽试、伤口脓汁、分泌液、胸腹水、尿液及血液等合格临床标本。
1.2 对临床标本中分离鉴定的铜绿假单胞菌进行药物敏感试验。
2．质控菌株
标准菌株为铜绿假单胞菌ATCC2783、大肠埃希菌ATCC25922，由上海临床检验中心提供。
3．培养基
3.1 营养肉汤培养基：蛋白胨10g，NaCl 5g，牛肉粉3 g，蒸馏水1000ml。加热熔化，冷却至45～50℃，矫正pH7.4～7.6，分装于锥形瓶或试管内，加塞后高压蒸气灭菌103.43 kPa20 min。冷却后放阴暗处或4℃备用。
3.2 血液琼脂培养基：取灭菌后的普通琼脂培养基（pH7.6）加热熔化，冷至50℃左右，以灭菌操作于每100ml营养琼脂加灭菌脱纤维羊血5～10ml,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管制成斜面备用。
3.3 麦康凯（MAC）琼脂培养基：蛋白胨20g，氯化钠5g，乳糖10g，琼脂20g，蒸馏水1000ml，1%中性红溶液5ml。除乳糖、中性红外，其余成分加热熔化，调临 pH7.2，加入乳糖、中性红溶液，高压灭菌68.95 kPa15 min，冷却至50℃倾注平皿。
3.4 SS培养基：牛肉膏5g，蛋白胨5g，胆盐8.5g，硫代硫酸钠8.5～10g，琼脂18g，1g/L煌绿溶液0.33ml，柠檬酸钠10～14g，柠檬酸铁0.5g，乳糖10g，4g/L中心红水溶液4.5ml，蒸馏水1000ml。将牛肉、蛋白胨和琼脂加入水中，加热溶解，再加入除中性红、煌绿以外的其余成分，微加热溶解，调 pH7.2，最后加入中性红、煌绿溶液，再煮沸5min（无需高压），待冷却至50℃倾注平皿。