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硕士论文 青岛地区部分蔷薇属植物的孢粉学和RAPD分析研究

  • 简介:硕士论文-青岛地区部分蔷薇属植物的孢粉学和RAPD分析研究,共63页,36634字,摘 要,本文对青岛地区蔷薇的 1 个变种、20 个品种进行了孢粉学和 RAPD 分析研究,同,时采用聚类分析的方法对其亲缘关系进行了探讨。旨在对蔷薇品种分类及...
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适用专业:园林植物与观赏园艺
适用年级:大学
论文编号:197701

论文简介:
硕士论文-青岛地区部分蔷薇属植物的孢粉学和RAPD分析研究,共63页,36634字
摘 要
本文对青岛地区蔷薇的 1 个变种、20 个品种进行了孢粉学和 RAPD 分析研究,同
时采用聚类分析的方法对其亲缘关系进行了探讨。旨在对蔷薇品种分类及引种育种提供
理论依据。主要研究结果如下:
1 对蔷薇花粉进行了电镜观察,发现花粉形态特征较为一致:花粉粒多呈超长球形、
长球形,赤道面观为椭圆形或长椭圆形,极面观为三裂圆形或近圆形,具三孔沟,以等
间距环状分布,为 N3P4C3 类型。花粉极轴长( P) 32.26μm- 49.16μm,赤道轴长
16.20μm—23.15μm ,为中等大小类型花粉。蔷薇花粉外壁纹饰以条纹和覆盖层穿孔为
主。
2 通过花粉形态聚类分析,蔷薇的 1 个变种、20 个品种共分为四类:Ⅰ‘银海繁星’、
‘红果玉蝶’、‘银盘金心’、‘冰蝶’、‘娇容三变’、‘堆云’,共 6 个品种;Ⅱ‘如霜’、
粉团蔷薇、‘冰清’、‘淡粉’、‘粉霞’、‘胭脂’、‘俏粉’、‘红毯’7 个品种,1 个变种;
Ⅲ‘粉面桃花’、‘欢颜’、‘藤桑戈尔总统’、‘藤白杰作’、‘藤新黎明’,共 5 个蔷薇品
种;Ⅳ‘玉蝶’和‘蝶舞’2 个品种。
3 本试验探索出适合蔷薇的 DNA 提取及 RAPD 的反应体系和扩增程序,16 条随机
扩增引物 ,共扩增出条带 175 条,平均每个引物扩增出 10.9 条,其中多态性条带 151
条,多态性为 86.3%,表明供试蔷薇品种间存在丰富的遗传多态性。
4 利用 UPGMA 法构建树状聚类图,以 0.667 为阈值,蔷薇的 1 个变种 20 个品种被
聚为两大类:Ⅰ包括 13 个品种 1 个变种:‘银海繁星’、‘如霜’、‘银盘金心’、‘冰蝶’、
‘蝶舞’、‘玉蝶’、‘娇容三变’、‘堆云’、‘红果玉蝶’、‘俏粉’、‘冰清’、‘淡粉’、‘粉
霞’、 胭脂’、 粉面桃花’、粉团蔷薇;Ⅱ包括 5 个品种: 欢颜’、 红毯’、 藤白杰作’
‘藤桑戈尔总统’、‘藤新黎明’。
5 蔷薇的孢粉学分类与分子标记分类有相吻合之处,但也存在不一致之处。其中Ⅰ
Ⅱ(‘红毯’除外)与 RAPD 分类中的第一类一致,Ⅲ(‘粉面桃花’除外)与 RAPD
中的第二类一致。通过分子标记的聚类结果和传统分类结果、孢粉学分类结果相结合,
结果更可靠,对育种和种质资源保护有更大的指导意义,如何将三者更好地运用到花卉
品种分类中有待进一步研究。
关键词:青岛,蔷薇,花粉形态,RAPD 分析
目 录
缩略词表 …………….ⅰ
摘要 ⅱ
A b str ac t. ⅲ
1 前言 …………… 1
1.1 蔷薇研究概 况 … 1
1.1.1 蔷 薇资 源研究 1
1.1.2 蔷薇繁殖研究 …………………… 2
1.1.3 蔷薇杂交育种研究 ……………… 3
1.1.4 蔷薇孢粉学研究 ………………… 4
1.1.5 蔷薇分子生物学研究 …………… 4
1.1.6 蔷薇分类研究 …………………… 5
1.2 花粉形态学在观赏植物中的应用 5
1 . 3 R A PD 标记及其在观赏植物中的应用 … … . 6
1.3.1 分 子标 记概述 6
1 . 3 . 2 R A PD 标 记原理 . 7
1 . 3 . 3 R A PD 技 术 在 观赏 植物 中的 应 用 … … … … 8
1.3.3.1 RAPD 技术在系统发育及演化方面的应用 …………… 8
1 . 3 . 3 . 2 R A PD 技 术 在亲 缘关系 方面的应 用 … … …… . 8
1 . 3 . 3 . 3 R A PD 技 术 在品 种分类 方面的应 用 … … …… … . 8
1 . 3 . 3 . 4 RA PD 技术在种质资源和群体遗传多样性方面的应用 … … … … . . 9
1 .3 .3 .5 RA PD 技术在指纹图谱方面的应用 9
1 .3 .3 .6 RA PD 技术在辅助选择育种方面的应用… … 9
1.3.3.7 RAPD 技术在其它方面的应用 ……… …… …… …………… .10
1.4 本研究的目的意义 ……………… 10
2 蔷 薇 的 孢 粉 学 研 究 … … … …… … … … 11
2 . 1 材 料 与方法 … … …… … 11
2 . 1 . 1 材 料 … …… . 11
2.1.2 方法 ………… . 12
2.2 结果与分析 …… 12
2.2.1 蔷薇花粉形态特征 ……………… 12
2.2.1.1 花粉粒形态与大小 ……………… 12
2.2.1.2 花粉粒外壁 纹饰 ………………… 16
2.2.1.3 花 粉 萌发孔特 点 ………………… . 1 6
2.2.2 花粉败育 现象 . 16
2.2.3 主成分分析及聚 类分析 …………… . 16
2.2.3.1 主成 分分析 . 16
2.2.3.2 聚类分析及类群划分… … 1 8
2.2.3.3 花 粉 形态与品 种分类 …………… . 2 0
2.2.3.4 植 株 外部形态与花粉形态分类 … . 20
2.3 讨论 …………… . 20
2.3.1 关 于 蔷薇花粉形态学研究的意义 … . ………………… .. 20
2.3.2 花粉形态分类与外部形态分类的矛盾与统一 …………… . 21
3 蔷薇的 RAPD 分析 ………………… .. 23
3.1 材料与方法 …… 23
3.1.1 材料 ………… 23
3.1.2 试剂 与仪器 … 23
3 .1 .3 DNA 提取 … … … … 2 4
3 .1 .4 DNA 检测 … … … … 2 4
3 . 1. 5 PCR 扩增 … … … … 2 4
3.1.6 数据处理 …… 25
3.2 结果与分析 …… 25
3 .2 .1 DN A 提取 … … … … 2 5
3 . 2 . 2 R A PD 反应体 系 ( 2 0 μ l )的优化 2 6
3.2.2.1 M g 2 + 浓度 … 26
3 . 2 . 2 .2 d N T Ps 浓度 … … 2 6
3 . 2 . 2 . 3 Ta q 酶 浓 度 … 2 7
3.2.2.4 引物浓度和模板 DNA 浓度… 2 7
3 . 2 . 2 .5 PC R 扩增程序 … 2 7
3.2.3 蔷薇的 RAPD 分析 … … … …… . 28
3.2.3.1 蔷薇的遗传多态性分析 ……… .. 28
3.2.3.2 蔷 薇 的聚类分 析 ………………… . 2 9
3.2.3.3 蔷薇的遗传相似系数 ……… …… ………… …… . 30
3.3 讨论 …………… 30
3.3.1 基因组 DNA 的提取 … … … …… … … ………… … … 30
3.3.2 RA PD 反应体系的优化 … … …… … … … … .. 31
3.3.3 关于蔷薇的 RAPD 分析 ……… …… ……… …… ……..… 31
3.3.3.1 关 于 蔷薇的遗传多态性问题 …… 31
3.3.3.2 关于蔷薇的 RAPD 分类问题 …...…31
3.3.3.3 关 于 蔷薇的单、 重瓣问题 ……… . 3 2
3 . 3 . 4 花 粉 形态 分类与 R A PD 分 类比较 … … … . 3 2
4 结 论 …………… . 34
参考文献 ………… 35
图版 说明 …………… 4 0
致谢………………… 47


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