原文 |
膜片钳技术是从一小片(约几平方微米) 膜获取电子学方面信息的技术,即保持跨膜电压恒定———电压钳位,从而测量通过膜离子电流大小的技术。进行膜片钳测量时,将经过抛光的、尖端直径为1 - 2μm 的玻璃微吸管压在经酶清洁的膜表面,形成高阻封接,电阻可达10 - 100GΩ。由于电性能完全绝缘,微吸管阻抗相对较低,背景噪音降低,在微吸管内充灌适当盐溶液,同时施加电压,对膜片进行电压钳位,此时,通过膜片离子通道的电流便流入微吸管,再由银电极将该电流引入测量电路,再经过放大处理,便得到离子通道的离子流,从而能了解通过膜离子通道的离子运输、信号传递等信息。膜片钳技术(patch2clamp technique ,PC) 是原西德马普所Erwin Neher 和Bert Sakmann 于1976 年发明的,他们首先将此技术应用于神经细胞的乙酰胆碱受体通道的研究,由于他们对这一技术及其在医学研究中的应用作出了杰出贡献,而荣获1991 年诺贝尔医学奖。 |
目录 |
1 膜片钳技术原理 2 膜片钳技术在植物膜生物学中应用 3 信号转导 4 物质运输 5 细胞分泌 6 分子生物学研究 7 转运蛋白 |
参考资料 |
[1 ] Ward JM. Patch2clamping and other molecular approaches for thestudy of plasma membrane transporters demystified. Plant Physiol , 1997 ,114∶115121159 [2 ] Hedrich R ,Schroeder J I. The physiology of ion channels and electro2genic pumps in higher plants. Annu Rev Physiol ,1989 ,40∶5392569 [ 3 ] Lauge P. Ion transport through pores∶a rate theory analysis.BiochemBiophys Acta ,1973 ,311∶4232436 [4 ] Gelli A , Higgins VJ ,Blumwald E. Activation of plant plasma mem2brane Ca2 +2permeable channels by race2specific fungal elicitors. PlantPhysiol ,1997 ,13∶2692279 [5 ] 曹忠升,康华光,邹寿彬等, 《应用膜片钳技术研究细胞分泌》, 《生物化学与生物物理进展》,1992 ,19 (1) ∶14217 [ 6 ] Very AA ,Gaymand F ,Bosseux C ,et al. Expression of a cloned plantK+ channel in Xenopus oocytes ∶analysis of macroscopic currents. Plant J ,1995 ,7∶3212327 | |