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膜片钳与植物膜生物学研究

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原文

膜片钳技术是从一小片(约几平方微米) 膜获取电子学方面信息的技术,即保持跨膜电压恒定———电压钳位,从而测量通过膜离子电流大小的技术。进行膜片钳测量时,将经过抛光的、尖端直径为1 - 2μm 的玻璃微吸管压在经酶清洁的膜表面,形成高阻封接,电阻可达10 - 100GΩ。由于电性能完全绝缘,微吸管阻抗相对较低,背景噪音降低,在微吸管内充灌适当盐溶液,同时施加电压,对膜片进行电压钳位,此时,通过膜片离子通道的电流便流入微吸管,再由银电极将该电流引入测量电路,再经过放大处理,便得到离子通道的离子流,从而能了解通过膜离子通道的离子运输、信号传递等信息。膜片钳技术(patch2clamp technique ,PC) 是原西德马普所Erwin Neher 和Bert Sakmann 于1976 年发明的,他们首先将此技术应用于神经细胞的乙酰胆碱受体通道的研究,由于他们对这一技术及其在医学研究中的应用作出了杰出贡献,而荣获1991 年诺贝尔医学奖。


  目录

1 膜片钳技术原理
2 膜片钳技术在植物膜生物学中应用
3 信号转导
4 物质运输
5 细胞分泌
6 分子生物学研究
7 转运蛋白


  参考资料

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[5 ]  曹忠升,康华光,邹寿彬等, 《应用膜片钳技术研究细胞分泌》, 《生物化学与生物物理进展》,1992 ,19 (1) ∶14217
[ 6 ]  Very AA ,Gaymand F ,Bosseux C ,et al. Expression of a cloned plantK+ channel in Xenopus oocytes ∶analysis of macroscopic currents. Plant J ,1995 ,7∶3212327

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