论文简介：
硕士论文-鹅源优势菌群及纤维素分解菌的分离鉴定，共71页，42714字
摘要
机体内正常菌群（normal flora），亦称正常微生物菌群（normal microbiological
flora），指在动物、人类和植物的内环境（包括体内和体表）存在的一层微生物或微
生物层（microbiol zone），在正常情况下即动物处于健康状态时，并未出现异常或致
病现象，它与机体的免疫、营养、肿瘤、生物拮抗、急性与慢性感染等都有着非常密切
的联系。从目前研究进展来看，对猪、兔、鸡以及反刍动物和马属动物等体内正常微生
物群的研究已有相当多的报导，但对鹅肠道内微生物的研究却很少，且仅限于对鹅盲肠
内某种微生物的研究或对各肠段总菌数的研究，而对正常菌群在各肠道的分布情况国内
外至今尚无报道。因而有必要对鹅肠道正常菌群进行研究，为鹅微生态学的研究奠定基
础。
纤维素是地球上最丰富、来源最广泛的有机物质。由于技术等诸多原因，这一类宝
贵资源，不仅未得到充分利用，而且有相当大部分还被废弃，成为环境污染物之一。目
前国内外对分解纤维素能力较强的真菌及其产酶活力研究很多，但绝大多数都是从土
壤、腐烂物以及粪便中分离所得，然而至今未见从家禽体内分离纤维素分解菌的报道。
为了提高纤维素资源的利用率，进行鹅肠道纤维素分解菌的分离鉴定显得尤为必要。
本论文通过在日粮中添加不同比例的羊草，初步探明成年鹅肠道中正常微生物区
系，并对其理化特性进行了研究，同时利用纤维素刚果红培养基初筛，滤纸失重试验结
合 FPA 测定试验复筛的试验方案进行纤维素分解菌的分离，主要获得如下研究结果：
1.不同含量 CF 对鹅肠道中正常菌群有重大影响，日粮中 CF 含量为 9%时，优势菌群
数量较多（P<0.01），说明鹅能够较快地适应日粮 CF 含量的变化，以维持鹅肠道菌群平
衡。另外，各肠段食糜 pH 均为 CF9%组低于 CF5%组（P<0.01），说明在日粮中增加羊草
粉含量能够降低肠道 pH，形成的酸性环境有利于肠道微生物发酵。
2.通过稀释滴种的细菌定量方法，研究了不同 CF 水平日粮对成年鹅肠道的四个部
位（十二指肠、空肠、回肠、盲肠）内容物中正常菌群的数量变化，确定了鹅肠道中的
优势菌群为双歧杆菌（8.21±0.8 个/g）、梭菌（7.98±0.4 个/g）和乳酸杆菌（7.33±
0.4 个/g）。盲肠内细菌数显著高于其它肠段（P<0.01）。葡萄球菌和拟杆菌的分离率最
低。各肠段内细菌总数 CF9%组高于 CF5%组（P<0.01），公鹅高于母鹅（P<0.05）。本试
验中鹅肠道内容物中细菌总数为 106～108 个/g，与猪、鸡肠道内总菌数 1011 个/g 有较大
差别，而与兔盲肠内总菌数 107～108 个/g 相似。
3.利用纤维素刚果红培养基初筛，滤纸失重试验和酶活测定试验复筛，从高纤维组
鹅盲肠中筛选到 1 株纤维素分解能力较强的真菌 F67。经中国科学院微生物研究所实验
室鉴定,F67 为草酸青霉（Penicillium oxalicum Currie &Thom）。该菌在以纤维素为唯
一碳源的培养液中，28℃振荡培养 8d，能够使滤纸纤维素失重率达 28.53%，滤纸酶活
力（FPA）可达 449.79U/g。
4.试验结果表明，在鹅的肠道中，真菌分解纤维素的能力最强，放线菌次之，细菌
最差（P<0.01）。而且鹅肠道中纤维素分解菌的数量 CF9%组高于 CF5%组（P<0.01），说
明高纤维日粮可以促进鹅肠道中微生物的发酵。
关键词：鹅；肠道；纤维素；正常菌群；纤维素分解菌；分离鉴定
目 录
前言I
摘要II
英文摘要……………………Ⅳ
缩略符号……………………Ⅵ
文献综述………………1
1.畜禽肠道正常菌群的研究现状…………………… 1
1.1 肠道微生物的定植规律…1
1.2 肠道微生物群与宿主的关系………………………1
1.3 畜禽肠道正常菌群的种类和数量…………………3
1.4 菌群失调…………………4
1.5 动物微生态制剂的研究…4
1.6 小结………………………5
2. 饲用纤维素酶及产酶微生物研究现状……………5
2.1 纤维素酶的组成成分、特性及来源………………6
2.2 饲用纤维素酶的作用机理………………………8
2.3 纤维素酶的应用现状……9
2.4 小结……………………11
研究内容……………………11
1 不同纤维水平日粮对鹅肠道正常菌群的影响………………………12
1.1 材料与方法…………13
1.1.1 试验材料……………13
1.1.2 培养基及培养对象的选择……………………14
1.1.3 各肠段内容物的稀释15
1.1.4 滴种及培养…………15
1.1.5 菌落观察计数………16
1.1.6 纯培养………………16
1.1.7 染色、镜检……………16
1.1.8 生理生化指标测定…16
1.1.9 统计分析……………18
1.2 结果与分析……………18
1.2.1 pH 值测定结果………18
1.2.2 分离细菌的鉴定结果19
1.2.3 鹅肠道主要菌群的数量变化…………………22
1.2.4 鹅肠道菌群与其他动物比较…………………24
1.3 讨论……………………25
1.3.1 不同肠段间细菌数值的比较…………………25
1.3.2 不同动物种类肠道内正常菌群组成和数量的比较……………………26
1.3.3 不同动物种类肠道内厌氧菌与需氧菌比例的比较……………………26
1.3.4 不同纤维水平日粮对鹅肠道 pH 值的影响……26
1.3.5 鹅消化和利用纤维素机理的探讨……………26
1.3.6 下一步工作…………27
1.4 小结……………………27
2 鹅源纤维素分解菌的筛选及鉴定…………28
2.1 材料和方法……………29
2.1.1 试验材料……………29
2.1.2 样品采集……………31
2.1.3 菌株的分离培养和筛选………………………31
2.1.4 纤维素分解菌酶活力的测定…………………32
2.1.5 分离菌株的急性毒性试验……………………33
2.2 结果与分析……………33
2.2.1 菌种的初筛结果……33
2.2.2 筛选菌株滤纸失重率36
2.2.3 液体发酵……………38
2.2.4 分离菌株的毒性试验38
2.2.5 分离菌株鉴定结果…38
2.2.6 菌种的保存…………39
2.3 讨论……………………40
2.3.1 培养基的筛选………40
2.3.2 鹅消化利用纤维素的机理……………………41
2.3.3 混合菌株的选育……41
2.3.4 产酶条件的优化……41
2.4 小结……………………42
全文结论……………………43
参考文献……………………44
附录48
致谢51
硕士期间发表论文…………52

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